28.08.2015

Этап 3

Резюме проекта, выполняемого в рамках ФЦП

«Развитие фармацевтической и медицинской промышленности Российской Федерации на период до 2020 года и дальнейшую перспективу»

по этапу № 3

Номер контракта: 14.N08.11.1036

Тема: «Доклинические исследования антикоагулянтного лекарственного средства на основе фукоидана»

Приоритетное направление: 4. Науки о жизни

Критическая технология: 4. Биомедицинские и ветеринарные технологии

Период выполнения: 2015-2017 гг.

Плановое финансирование проекта:

Исполнитель: Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Мурманский морской биологический институт Кольского научного центра российской академии наук (ММБИ КНЦ РАН)

Ключевые слова: доклинические исследования, инновационное лекарственное средство, антикоагулянт, фукоидан, фукус пузырчатый (Fucus vesiculosus), тромбоз, тромбофлебит

1. Цель исследования, разработки

Цель реализуемого проекта - доклинические исследования лекарственного средства растительного происхождения на основе водорослевого полисахарида фукоидана для лечения и профилактики тромбофлебитов и тромбозов вен нижних конечностей.

2. Основные результаты проекта

На 1-ом этапе разработана новая технология фармацевтической субстанции (ФС) фукоидан из слоевищ фукуса пузырчатого Баренцева моря. Разработаны и валидированы (частично) основные методики стандартизации слоевищ фукуса пузырчатого и ФС фукоидан. В соответствии с методиками проведен анализ качества опытных образцов ФС фукоидан и закладка их на хранение для изучения стабильности.

На 2-м этапе проведены исследования специфической антикоагулянтной активности ФС фукоидан и изучение механизмов ее действия. В ходе исследования в условиях in vitro и in vivo установлено, что ФС фукоидан обладает высокой антикоагулянной активностью. Субстанция ФС фукоидан, так же как и Гепарин, в большей степени влияет на внутренний путь свертывания (АЧТВ и ТВ), чем на внешний (ПВ), значительно увеличивает антиXа активность и снижает скорость агрегации тромбоцитов. Субстанция ФС фукоидан влияет не только опосредованно, как и Гепарин, на фактор свёртывания крови Xа (фактор Стюарта-Прауэра)  через тромбин АТ III, но также влияет непосредственно на фактор Xa, что выгодно отличает ее от Гепарина. Установлено, что наиболее вероятный механизм действия тестируемой субстанции - блокирующее действие на «внутренний» путь коагуляционного гемостаза. Разработаны состав и технологии получения готовой лекарственной формы (ГЛФ) в форме мази и в форме таблеток ФС фукоидан. Пероральная лекарственная форма таблетки для фукоидана разработана впервые. Разработаны и валидированы (частично) основные методики стандартизации ГЛФ в виде мази и таблеток на основе ФС фукоидан. Проведено исследование специфической фармакологической активности ГЛФ в форме мази и таблеток ФС фукоидана; установлено, что лекарственный препарат при многократном нанесении увеличивал показатели АЧТВ и ТВ, проявлял дозозависимую ингибирующую активность в отношении активированного Х фактора свертывания (фактора Стюарта-Прауэра). Наиболее вероятный механизм действия ГЛФ в форме мази фс фукоидан - блокирующее действие на «внутренний» путь коагуляционного гемостаза и на процесс формирования фибрина.

Впервые проведено экспериментальное исследование специфической фармакологической активности ГЛФ в форме таблеток фс фукоидан; установлено, что лекарственный препарат достоверно удлиняет тромбиновое время (ТВ), аналогично референтному препарату Вессел Дуе Ф, проявляет ингибирующую активность в отношении активированного Х фактора свертывания. Наиболее вероятный механизм действия ГЛФ на основе ФС фукоидан в форме таблеток- ингибирующее действие на фактор Ха и на образование фибрина.

На 3-м этапе проведены исследования острой токсичности ФС фукоидан и ГЛФ на основе ФС фукоидан в виде мази и таблеток. В результате проведения экспериментов в условиях in vivo установлено, что ФС фукоидан, ГЛФ фукоидан мазь и ГЛФ фукоидан таблетки не оказали токсического действия на организм лабораторных животных. Подобные результаты получены и при исследовании хронической токсичности ГЛФ фукоидан мазь и ГЛФ фукоидан таблетки: препараты отнесены к классу малотоксичных веществ. Летальные эффекты в группах экспериментальных животных, получавших тестируемые препараты во всех дозах, отсутствовали, как при изучении хронической токсичности, так и при исследовании острой токсичности.

Проведены исследования фармакокинетики ГЛФ на основе ФС фукоидан в виде мази и таблеток. На основании проведенных экспериментов проведен расчет основных фармакокинетических параметров исследуемых препаратов. Статистически значимых различий основных фармакокинетических параметров после однократного и многократного нанесения препаратов ГЛФ Фукоидан мазь и ГЛФ фукоидан таблетки не установлено.

Проведены исследования антиоксидантной активности ГЛФ на основе ФС фукоидан в виде мази и таблеток. Установлено, что и ГЛФ мазь, и ГЛФ таблетки обладают антиоксидантными свойствами, ингибируя свободно радикальные процессы и активируя антиоксидантную систему организма. Проведены исследования противовоспалительной активности ГЛФ на основе ФС фукоидан в виде мази и таблеток. В результате проведения экспериментов установлено, что ГЛФ Фукоидан в форме мази оказала выраженный лечебный (противовоспалительный и обезболивающий) эффект, сопоставимый с таковым препарата сравнения Диклофенак мазь.

В соответствии с календарным планом работ на 3 этапе за счет внебюджетных средств разработаны проекты фармакопейная статья предприятия на ГЛФ фукоидан мазь и ГЛФ фукоидан таблетки совместно с пояснительной запиской.